Flavio Insinna urodził się w Rzymie. Uczęszczał do liceum o profilu klasycznym. Następnie rozwijał swój talent w Gigi Proietti Laboratorio, gdzie poznał wielu wybitnych aktorów teatralnych. W szkole Proiettiego nauczył się jak ucieleśniać każdą rolę, jak sprawić by była prawdziwa i wiarygodna.

Jest aktorem teatralnym, telewizyjnym oraz filmowym. Karierę rozpoczął od udziału w serialu "Uno di Noi". Jednak największym serialowym hitem okazał się "Don Matteo", w którym wcielił się w rolę kapitana Flavio Anceschi.