James Callis dorastał w Londynie gdzie uczęszczał do Harrow School w North West London. w 1990 roku zaczął studiowac literature angielską na Uniwersytecie Yorku. Po dyplomie w 1993 roku, James dostał sie do London Academy of Music & Dramatic Arts, którą ukończył w 1996 roku. Od tego czasu zaczął pojawiac się w róznych produkcjach z West Endu oraz serialach telewizyjnych, a także w radio. Za swój debiut na West Endzie w "Old Wicked Songs", gdzie partnerował m.in. Bobowi Hoskinsowi, otrzymał nawet nagrodę Jack Tinker Award dla najbardziej obiecujacego debiutanta. James, który wierzy, że "trzeba spróbowac wszystkiego", zangażował się równiez w projekty po drugiej stronie kamery, jako scenarzysta i reżyser. jęgo reżyserskim debiutem był film "Beginner's Luck". W 2000 roku zakończył zdięcia do swojej pierwszej kinowej roli w "Dzienniku Bridget Jones".
James ma dwie siostry. Mieszka w Londynie ze swoja żoną Neha i ich małym synem Joshem, urodzonym w 2003 roku. Oprócz aktorstwa, reżyserii i pisania, gra także na pianinie i gitarze na profesjonalnym poziomie.