Lois Nettleton urodziła się 6 sierpnia 1927 roku w Oak Park w stanie Illinois. W 1948 roku została wybrana miss miasta Chicago. Występy w telewizji zaczęła zaraz po wojnie. Zagrała kilka drobnych ról w serialach takich jak: "Studio One", "Bonanza", "Strefa mroku", czy też "The Alfred Hitchcock Hour". Natomiast za rolę Virginii Benson z serialu "General Hospital", dwukrotnie otrzymała nagrodę Daytime Emmy Awards. Ze znaczących filmów w jej karierze aktorskiej można wspomnieć m.in. "Valley of Mystery", "Last Bride of Salem", "Rodeo życia", "Dobrzy chłopcy i źli chłopcy" i "Śmiertelne błogosławieństwo". W roku 1960 poślubiła Jean Shepherda, z którym rozwiodła się w 1967 roku. Lois Nettleton zmarła na raka płuc 18 stycznia 2008 roku w Woodland Hills (Los Angeles, Kalifornia).